如果你曾經使用過二氧化碳培養箱很長時間,你可能會遇到污染的某一點。根據Thermo Fisher Scientific(Waltham,MA)的全球細胞培養**Mary Kay Bates,“我們的現場調查告訴我們,全球87%的實驗室工作人員每年**少有一次細胞培養物污染事件,許多有多個。“她補充說,實驗室的人通常會造成污染。“微生物是我們不變的伴侶,我們對我們的皮膚,在我們的嘴里等進行數萬億次。”Bates解釋說。除此之外,微生物在實驗室中堵塞空氣,每立方米中有30到1000個。“所以每次培養箱門打開,都有污染的風險,”貝茨說。問題是,你怎么打這個?
其他**還指出了二氧化碳中污染的普遍問題。The Baker公司(Sanford,ME)的營銷經理Cheri Gaudet說:“這是一個普遍和嚴重的問題,對生命科學研究的完整性的真正威脅。”Gaudet還指出了一些其他的關注問題,意外或意外的事件可能在室內引入污染,包括板或燒瓶的撞擊,或者敲入架子的菜。“她補充說,”同樣關注的是交叉污染,其中文化相互污染,污染的培養物被引入到室中并且污染擴散。
對于許多二氧化碳,用HEPA過濾器過濾空氣提供了抵抗污染的關鍵元素。只是有一個良好的過濾器,但是,是不夠的。“只是說一個單位提供[HEPA過濾器]并不意味著設計是有效的,”貝茨說。“需要主動氣流循環,但它必須溫和分布,以便培養物不會變干。
新的Thermo Scientific THRIVE主動氣流系統每分鐘過濾整個腔室空氣量,并在門打開30秒后的5分鐘內提供ISO 5無塵室條件。正如貝茨說的,“仔細研究這些技術以及培養箱如何快速清潔室內環境非常重要,而不僅僅是它具有HEPA過濾。
CO2培養箱中的空氣的其他方面也是重要的。正如Gaudet所說,“使用閉環控制算法來調節相對濕度可以防止冷凝,這是污染的主要原因。”她補充說,“閉環控制算法主動對室內的氣氛進行采樣,并使用數據收集實現并保持濕度設定點。
為了使濕度控制盡可能容易,尋找使用霧化器的二氧化碳。“這項技術消除了對水盤的需要和污染的風險,通常隨之而來,”Gaudet說。“此外,垂直的,單向的向下氣流是二氧化碳的新技術; 它防止可能使空氣傳播的污染物擴散到整個室的湍流。
二氧化碳培養箱的內部也很重要; 例如,銅表面可以幫助。Bates說,“Thermo Scientific二氧化碳只使用100%純銅,質量**好,維護方便”。其他培養箱部件的細節也很重要。正如Gaudet指出的,“加熱的室內玻璃門是無霧的,這不僅有助于防止玻璃上的污染物的生長,而且消除了打開門以觀察培養物的需要,降低了空氣中顆粒污染的風險。
Baker's Cultivo培養箱包括無霧內門和一系列其他抗污染功能。“事實上,”Gaudet說,“我們稱之為Cultivo”污染預防劑“,因為它配備了一系列污染預防和控制技術。”包括InteliCELL,Baker專有的控制算法,調節濕度,溫度和CO 2水平。根據Gaudet,它“幾乎消除了污染物可以生長和擴散的冷凝區域。
**終,數據**重要。Gaudet說,“為了安全起見,請始終要求您的供應商提供測試結果以證實營銷聲明,并仔細檢查測試方法和結論。
“清洗培養箱的基本任務幾乎沒有改變,重要的是定期清潔內部,以確保清除溢出的媒體,舊文化,灰塵和污垢,”貝茨說。Thermo Fisher Scientific建議**少每月進行一次清潔并每兩周更換一次加濕器水。當談到清潔時,貝茨補充說,“越來越多的公認的是揮發性有機化學品,如漂白劑或酚類對培養細胞的負面影響,因此我們建議只使用基于季銨的消毒劑和/或70%的乙醇在用溫和洗碗皂清洗后進行手動消毒“。她指出,這兩種溶液對細胞都是安全的。
Gaudet補充說:“氣化的過氧化氫生物消毒方案現在可用,在足夠高的濃度,如15%的H 2 O 2 -完全殺死各種各樣的污染微生物,包括孢子。”她指出,這加速了過程從一個典型地12小時或更多**小于4小時。不過,她鼓勵客戶分析公司測試。此外,她說,“了解什么微生物是主要關注的,并檢查測試方法和結論,以合理地確保它將幫助您實現您的目標。
此外,法GG家科學研究中心(CNRS)的助理教授讓·皮埃爾·戈麥斯在奧爾良,在清洗后噴灑水浴缸消毒劑AnioSpray。
一些裝置提供用于消毒的其它選項。Bates說,“新的自動化Thermo Scientific Steri-Run滅菌周期為消毒CO2培養箱提供了一個完整而快速的方法,無需高壓滅菌或使用苛刻的化學消毒劑。”她補充說,“47個位置的詳細溫度測繪表明,所有區域達到指定溫度,意味著微生物可以存活的冷點,如在其他培養箱中可以發現的。
為了確保二氧化碳培養箱滿足實驗室的需要,請仔細考慮您需要的功能,然后確保供應商能夠證實所有關于防護和消毒設備的聲明。使用正確的設備和仔細的方法,您應該能夠減少實驗室中的污染問題。