CO2培養箱/新Brunswick S41i / Eppendorf |
CO2培養箱/ CO2CELL BMT USA |
實驗室經理根據經驗和個人品味指定這些設計。在水套培養箱中工作良好的方法很可能保留在這種類型的設備中。
水夾套培養箱以溫度穩定性而聞名,但是比直接加熱單元更慢地回到溫度設定點,比如打開門之后。在電源故障的情況下,水套培養箱保持更長時間,但在電源恢復后需要更長時間才能恢復到設定點。由于水套,它們對于給定的工作體積也更大和更重。
水套單元的維護也有些復雜。用戶必須向夾套水中添加除藻劑,這些培養箱不能采用高熱消毒。無論如何,實驗室傾向于堅持過去的工作,這保證了盡管失去了直接加熱培養箱的一些市場份額,對水套裝置的需求不會很快消失。
許多直接加熱孵育器現在是無風扇的,這提供了幾個好處。BMT USA(蒙羅,華盛頓州)科學部門業務發展經理Rick Ellison解釋說:“通過自然對流移動空氣而不是通過風扇強迫空氣移動,可以減少冷凝和交叉污染。無風扇設計還通過消除清潔進入空氣的HEPA過濾器的替換來減少維護,因此消除了由風扇本身引起的任何清潔或污染問題。
使用培養箱,機械復雜性越小越好。“其他設計可能同樣有效,但他們引入更多的變量,”埃里森說。“變量越少,出現錯誤的可能性越低。
物理位置是確保二氧化碳培養箱高性能的關鍵。Eppendorf(Enfield,CT)的產品經理Lynn Philip建議保持培養箱遠離通風口和陽光直射,這兩個因素都會產生大氣變化,從而影響培養箱并縮短其使用壽命。“通風吃水也攜帶細菌和真菌污染物,”菲利普警告。
CO2培養箱/ CellIQ™/ Panasonic Healthcare /
無論使用中央氣體系統還是單個氣體罐,用戶都應在CO2入口安裝在線壓力調節器,以確保氣體以推薦的方式供應**小壓力。根據菲利普,根據**佳壓力可能導致性能降低和恢復緩慢,而太高的壓力可能損壞氣體系統。“另外,盡量減少開門的頻率和長度,以保持**佳的細胞培養環境,”她說。“分開的內門可以減少開門過程中文化氣氛的損失。
現在幾乎所有的培養箱都配備了自清潔技術。**常用的是高熱消毒,這是免費的。對于常規維護,飛利浦建議用70%異丙醇或制造商推薦的消毒劑清潔。
說污染和/或交叉污染是什么時候的問題,而不是如果變成陳腔濫調。所有更多的理由實驗室為這種可能性做準備。
埃利森推薦的系統具有“強大的滅菌,而不僅僅是凈化”。BMT的滅菌技術的選擇是干熱高溫的應用,但其他方法可能是有效的。不管選擇什么方法,它應該是盡可能自動化的(因此是防錯的)。高熱比較低溫化學或過氧化氫滅菌需要更長時間,但實際上不需要用戶干預。
CO2培養箱/ C和CB系列BINDER / |
硼硅酸鹽玻璃培養管Denville Scientific |
過氧化氫滅菌可以基于減少的停機時間來證明。該技術涉及將過氧化物氣體引入室中,然后使其循環通過內部鼓風機。該技術與熱相比的缺點是表面和內部必須與氣體接觸。**終操作涉及用窄帶寬紫外光激活。制造商聲稱不需要高壓滅菌,因為所有組分在整個過程中保留在外殼內。但正如埃里森所指出的,過氧化物滅菌留下一些殘留的無菌水,長期不保持原始狀態,需要人工去除。然而,制造商要求用于過氧化氫滅菌的約2小時的停機時間,對于高熱量的14小時。
Binder公司(Bohemia,NY)的總裁Uwe Ross將目前正在進行的污染討論比作“打死一匹死馬”。但是去污方法的擴散表明問題仍未解決。“就個人而言,我相信在180°C的熱空氣滅菌是**真正有效的方法,但即使這種技術也無法解決使用過程中滅菌后發生的情況。
污染來自生物體沉積在表面上并在冷凝的輔助下生長。這導致將工作表面積減小到****小值的設計方法; 較少的表面等于微生物生長的較少空間。
二氧化碳培養箱將做它的工作,以保護實驗或過程,但只有當操作者遵循**佳實踐。在其細胞培養的優秀引物中,Invitrogen提出以下污染預防劑:
“回顧短期和長期的實驗室和細胞培養需求,以確定購買的關鍵因素,”菲利普說。所有培養箱都可以控制溫度,CO 2和可能的O2,但單位可能在設計和性能上有顯著差異。如果污染是一個問題,實驗室經理應特別注意培養箱的設計和時間拆卸,清洗,重新組裝和消毒。“了解未來的要求,因為CO2培養箱是一項長期投資,”Philip繼續說。“必須評估頭五年的總體擁有成本,包括初始價格,安裝,燃氣使用,清潔的時間和人力,常規備件等,以確定**佳的價值。
CO2培養箱/ Heracell™240i / Thermo Fisher Scientific
制造商和**終用戶強調溫度均勻性和恢復到設定條件。Thermo Fisher Scientific(Asheville,NC)全球細胞培養**Mary Kay Bates鼓勵買家調查這些性能因素。“請查看溫度映射和恢復數據。
在考慮回收時,說明參數是溫度,氣氛組成和濕度。“濕度是性能的關鍵,而不是每個人都喜歡,”貝茨補充說。
濕度防止水從培養基中蒸發,這導致營養物,礦物質和其他培養基成分變得更濃。“這可能會導致性能不佳,甚**死亡,”貝茨說。
在80%濕度下,蒸發比在95%濕度下高四倍,這說明為什么濕度是**。大多數實驗室中發現的低濕度,空調環境空氣加劇了這種影響。
精確的氧氣控制已成為現代培養箱工作的另一個必要條件,特別是對于缺氧(低氧)培養物。生物體內的氧氣水平比大氣中的21%水平低得多。此外,所有電池具有獨特的氧氣需求。肝,腎和心臟細胞在生物體內在獨特氧水平下**佳地發揮功能,其甚**可在器官內改變。例如,肝細胞需要介于4%和12%之間,這取決于它們與含氧毛細血管的接近程度。神經,乳腺癌和免疫細胞將遷移遠離氧梯度,但中G倉鼠卵巢細胞用于生物制造不會。隨著研究人員越來越需要幾乎沒有氧氣存活的細胞,對微調氧水平的需求從未如此之大。
IPSC的衍生神經細胞/ AMSBIO /
“缺氧文化要求在整個氧氣均勻,以保證底部貨架上的細胞接收相同濃度的中部或上部架細胞,”貝茨說。“你想盡可能重復生理條件。
除了溫度均勻性和關鍵培養條件的恢復,Bates建議購買者考慮自動消毒,以節省與手動清潔和高壓滅菌相關的時間和成本。例如,大型細胞培養反應器使用自動化就地清洗或現場蒸汽技術; 培養箱使用化學品和/或熱。一些設計要求使用者去除內部部件并且單獨地清潔或高壓滅菌它們,而在其它設計中,部件被消毒就位。無論消毒方案如何,其本身不應引起污染或細胞損傷的風險。