1. 培育箱消毒:先用純水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就能夠拉!留意周圍環境的清洗就不會那么簡單污染的拉!
2. 我的經驗是在彌補水時**佳把水加熱一下,到達培育箱的溫度。
3. 這么早就養細胞了,咱們這里通常是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新潔爾滅擦洗,不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1:1份額熏一遍。留意要是熏的話千萬留意混合以后馬上脫離,然后密閉細胞培育室,滋味很影響的。**佳在養細胞前消毒,否則,的確沒地方放細胞。
4. 咱們的辦法比較簡單,先用75%酒精擦洗內壁,通風10分鐘,紫外線照耀30分鐘即可。
5. 咱們的通常處理是先用75%的酒精擦洗內壁,然后用甲醛+高錳酸鉀熏蒸一個黑夜,然后通風一整天(一同翻開紫外線照耀)。
6. 咱們是把培育箱里的板層拿出來高壓一下,箱壁用75%酒精擦一遍,換用詩樂氏擦一遍,再紫外照一夜,作用極好,別的的請高手指導。
7. 熏蒸后吹**是肯定不行的,**起碼要一個星期才能夠讓甲醛散盡,要不細胞長欠好的
8. 有的培育箱能加熱內壁到90度,也有的帶有紫外線功用。慣例應當每周用酒精擦洗內部一次。詳細的操作請參閱培育箱的手冊,或著咨詢培育箱技術支持。運用消毒劑應當心,培育箱內有檢查溫度、濕度和二氧化碳濃度的傳感器,腐蝕性消毒劑或有機溶劑有也許損壞某些器件,請慎用。別的,揮發性的甲醛有毒,易燃、易爆。假如在培育箱內殘留甲醛的話,細胞會死光光哦(我實驗室的真實故事)。總歸,先看培育箱手冊,再聯絡技術支持,方可萬無一失啊。9. 慣例**佳啥也不放!硫酸銅的作用是按捺細菌成長(但大都用在處理污染的孔板)。由于如今的孵箱都有抑菌功用。
10. 咱們實驗室的做法:把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺內參加適當的滅菌雙蒸水或許生理鹽水.再加少數新潔爾滅,濃度不要緊.細胞養的都能夠.
11. 我主張
1 **佳先把培育箱完全消毒.詳細辦法也是用75%的酒精好好清洗培育箱. 2,操作時嚴厲依照無菌操作的準則
3 我認為雙抗的替換疑問卻是不大,除非你正在運用的是污染的抗生素. 4 盡量減少觀看細胞的次數及時刻.
12. 咱們實驗室清洗培育箱的辦法:用洗衣粉或洗潔精洗一遍——清水沖凈——84消毒液洗——清水沖凈——75%酒精擦洗一遍
13. 這是咱們實驗室慣例的培育箱消毒辦法(通常一個月一次),期望對你會有用
14. shou要把培育箱里的東西悉數取出,放盡培育箱里的三蒸水;重復用三蒸水沖刷培育箱,然后用75%酒精擦3遍,以后再用三蒸水擦3遍;培育箱里的架子先用自來水重復沖刷,然后用蒸餾水、三蒸水、75%酒精各擦3次,于紫外下照耀消毒1 h左右;**終將三蒸水(里邊應加少數染料)參加培育箱,將消毒好的架子放入即
15. 培育箱應放置無菌室,水中應加適當的疊氮鈉(防腐)或許硫酸銅,留意空氣消毒.
16. 消毒培育箱的常用辦法有兩種:
把細胞移出,記住擰緊瓶蓋,通常放在超凈臺內,室溫一兩個小時,疑問不大。如培育室有空調,也可將空調翻開。然后先用75%酒精棉球擦洗培育箱內壁,留意不要漏掉任何一個旮旯。擦洗兩遍后用一蒸水或二蒸水清洗內壁,可多清洗幾遍。**終用消過毒的棉球或75%酒精棉球把內壁再擦洗一遍即可。悉數操作沒有必要在無菌條件下。**終可在培育箱的水里加上亞甲基藍,混勻即可。亞甲基藍溶液可起到必定的抑菌滅菌作用。待培育箱內酒精簡直揮發完時,將細胞放入培育箱中。
還有一種辦法即是直接用蒸餾水清洗完,然后再用紫外燈照(**佳是那種培育箱里就帶有紫外燈的,就便利多了。)
通常培育箱是需求定時清洗的,咱們室是1-2月清洗一次,當然這要依據細胞養的多少和培育箱運用的頻頻程度來決議的。
17. 咱們實驗室液發作過相似事情,我把咱們處理進程通知你,期望對你有協助:
shou要消毒培育箱,假如你們有兩個或以上培育箱就好辦了,假如只要一個且還有許多別的細胞就費事點。只能暫時的放在超凈臺上。詳細如下,正午將空調溫度打到**高(也只要31度),超凈臺開紫外。下午早點來關紫外,將細胞培育瓶蓋蓋緊,轉到超凈臺內,用75%酒精擦洗培育箱,再用無臭氧型可移動的紫外等照耀半小時,然后將細胞放回,松開蓋口即可(切記CO2瓶子閥門要關緊啊,否則氣全跑光了)。
通常實驗室長了霉菌的話,肯定要悉數消毒。
再消毒實驗室,先把室內空諧和消毒柜過濾網都拆下清洗,在錐形瓶內加點高錳酸鉀,放在實驗室地上,然后倒入甲醛,立馬關門走人就能夠了。
2天后再開門裝好東西,和往常相同開始工作了。由于2天不能干事,自己細胞要先方案好,大家都能夠歇息兩天。
18. 咱們實驗室是將細胞悉數取出,酒精擦洗培育相,然后用紫外線照耀4小時以上,污染細胞悉數丟掉。還有即是培育室也選用紫外線消毒
19. 我也碰過這個狀況,是自個的基礎培育基污染了,光鏡下面能夠看見瓶底有細細的黑色小顆粒,但詳細因素不詳。處理辦法: 1、被污染的細胞悉數照過紫外線2小時以上后丟掉; #p#分頁標題#e#
2、同一批的培育基、運用的細胞清洗液等等悉數從頭濾過消毒(有點舍不得悉數丟掉,就嘗試了一下,成果證實是能夠的);
3、翻開培育箱,用75%酒精擦洗,然后用新潔爾滅擦洗(此過程咱們重復了2次,隔天),用紫外照耀4小時以上;4、打掃培育室,紫外照4小時以上,重復一次;
后來就沒有啦。:)假如污染嚴重的話,那就要重復重復再重復了。
20. 偶也在年前遇到兩次大迸發,先是真菌后是細菌。搞得我對細胞培育都快失掉決心了,我養細胞都一年半了,往常細胞沒啥,感受養細胞是很簡單的事,但是當污染大迸發時真的有招架不住的感受。記住其時丟掉了簡直悉數的細胞,近一百瓶,就只剩余保種的三兩瓶,寒!!!**于處理辦法,也即是乳酸熏蒸(記住把培育箱及超凈臺翻開)以后一星期關門關窗,不再進培育室,一星期后75%酒精做完全滅菌,也即是用酒精搽培育箱及培育室里的悉數平面,乃**包含地上。到如今有四個月了,偶的細胞一向極好。主張不要慌張,所謂兵來將擋,水來土掩。呵呵呵,悉數會好起來的。
21. 看來你要大動干戈了。shou要思考培育基的疑問。能夠獨自放置一瓶培育基到別的的培育箱里培育24小時看看是不是培育基污染。不過主張仍是悉數丟掉從頭配置比較好。其次思考培育箱和培育室的疑問。根本上應當每一個月將培育箱完全消毒一次的。shou要用75%酒精擦洗,通常的培育箱都是能夠拆開的,將能拆開的有些拆開擦洗后放到烤箱里烘烤(180度5個小時)。剩余的培育箱里用戊二醛擦洗后用紫外燈重復照耀。然后在要用培育箱培育室之前再用紫外燈照耀消毒2小時。你的相片里顯現的應當是細菌污染,咳比較好抵擋。
22. 設置5%,卻顯現5.1%(當然這點差距真實不算太大,**于顯現HIGH CO2,那是能夠自個設定的,你能夠自個設定二氧化碳濃度到達多少時報警(也即顯現HIGH CO2,一同也許發出警鳴音,假如你沒有按MUTE按鈕或平等設置),同樣地,你能夠設置下限,還有溫度的上下限),培育箱溫度添加時CO2濃度會添加,反之亦然。檢查一下你的CO2減壓閥上面顯現的壓力指示是不是超越0.08MPa,長時間過高的CO2壓力簡單損壞培育箱內CO2壓力調理模塊,那樣需求許多銀子修理的。假如狀況進一步惡化,主張聯絡售后服務。
23. 手提式紫外燈
24. 1)一個大準則是:細菌和細胞系統是完全不一樣的,jue不能夠放在一同,通常實驗室均設置細菌間、細胞間,嚴厲的分隔是成功培育細胞的確保。2)關于CO2培育箱的清洗工作,應當說不難。由于為不銹鋼材,你用0.1%新潔爾滅擦洗潔凈后,在用2%的CuSO4清洗(清霉菌,在CO2條件下霉菌很易生/),**佳用70%乙醇噴霧消毒箱內空氣。再涼干后,再底部再加2%CuSO4(水稍出現蘭色即可)的滅菌水進行安穩培育箱,待培育箱溫度和濕度安穩后,再用一瓶細胞預實驗一下,培育2-3天,沒有疑問再進行培育。
25. 有的培育箱能夠直接高溫干烤滅菌的,或許有的金屬架能夠干烤
26. 底部水盤參加蒸餾水后見到一片一片的東西,很也許是細菌群落的成長!自己經驗是,必須清洗,并且是完全清洗潔凈!拆開支架和每層的托盤,包含水盤(留意拆開**佳先向技術員了解內部結構,以防誤拆損壞),用碘伏棉球將培育箱里里外外和拆出來的部件拭擦2次,然后再用酒精將殘留碘伏拭去。下一步是,翻開培育箱的門,開紫外照耀過夜,這么就可放心了。我剛回來即是如此弄的,培育的細胞并沒有感染痕跡,生機甚佳,供參閱!祝你好運!
27. 我運用的辦法是:
1 取下培育箱內的隔板及掛鉤,用清水清洗潔凈后,75%酒精完全擦洗消毒,然后120度烤箱,考1小時。
2,培育箱用清水擦洗潔凈后用75%酒精完全擦洗消毒 3,帶無菌手套,安裝好培育箱內的隔板及掛鉤 4,翻開培育箱紫外燈照耀30分鐘 5,高壓蒸餾水后參加
咱們一向即是這么做的,作用極好,能夠試試看啊。
28. 彌補一個水盤消毒的法子∶清水清洗潔凈,75%酒精完全擦洗消毒后,多弄些酒精上去,點火燒一下.作用杠杠的!!
29. 把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺內參加適當的滅菌雙蒸水或許生理鹽水.再加少數新潔爾滅,濃度不要緊
30. 水套式,氣套式二氧化碳培育箱。
31. 細胞成長的環境請求有必定濕度,必須加水!我的小經驗是: 1、雙蒸水裝在5L瓶中,2、高溫滅菌,3、移進細胞培育實驗室,在紫外照耀下冷卻,4、6小時后,在參加培育箱中運用。
假如發現托盤中的說有白色漂浮物存在是,盡量吸干!(此物思考是霉菌污染); 還有假如有條件,即是定時75%酒精大清洗!我通常2個月清洗一次!(包含細胞培育實驗室)
這么在無菌操作下,根本確保你革除污染!!
32. 培育箱內不加水是不規范的,由于細胞成長的環境請求有必定濕度。 咱們培育細胞不只經常堅持有水,并且培育液中不加任何抗生素。只要無菌操作過關,不會發作細菌污染。
33. 咱們實驗室往常培育箱的消毒辦法:(清洗前**佳開紫外30分鐘) 1、隔板的清洗:先將隔板卸下,用潔凈紗布沾新潔而滅擦兩遍; 2、箱內壁用新潔而滅擦洗后再噴75%酒精,關門熏蒸15分鐘; #p#分頁標題#e#
3、盛蒸餾水的盤子:把盤里的水倒掉,用新潔而滅擦洗,干后倒入三蒸水; 4、裝好板后,再噴75%酒精關門熏蒸30分鐘。 5、培育室開紫外照30分鐘以上。
34. 咱們實驗室是將悉數隔板卸下,新潔而滅擦洗,放在超凈工作臺內紫外滅菌,CO2孵箱內用紫外燈照耀12h以上。
35. 引薦辦法:拆開隔板,新潔兒滅搽3次,然后酒精搽3次,紫外下面照2小時,然后裝上隔板,箱壁同樣處理,翻開箱子,用小紫外燈或房間紫外燈照2小時。留意要搽頂部的螺旋槳。裝好后,噴酒精即可。別的,仍是用用硫酸銅比較好,飽和溶液放置在箱子底部。屢試屢爽,大概能夠管3-4個月沒有疑問。如有用,請斑竹加分,謝謝!
36. 加硫酸銅的意圖是為了避免真菌的成長,但硫酸銅簡單改動孵箱pH值,所以主張不加硫酸銅,直接加蒸餾水即可,堅持孵箱濕度.
37. 前一段時刻培育箱里老是有散在的細胞霉菌污染。培育箱高溫消毒后,如今翻開,發現里邊那扇玻璃門和墊圈會有許多水汽,培育瓶外壁也有。請問是怎么回事?細胞還能養嗎?是由于培育箱門的加熱毛病或設置過錯,致使門的溫度與箱內溫度不相同,所以引起玻璃門結水汽。對細胞培育沒多大的影響,由于箱內的溫度是正常的。
38. 這種狀況很常見,能夠用以下辦法處理:往水盤里的水參加適當的硫酸銅,拌和均勻即可,由于硫酸銅是重金屬鹽,能夠到達滅菌作用;別的也能夠加10%的新吉爾滅等無影響性的消毒物質。留意,千萬不能直接往水盤里加自來水,由于自來水里有許多潛在的霉菌等,一旦條件溫和它們就會迅速繁殖,**佳是用煮開的蒸餾水。留意了這些細節,疑問就方便的解決了